SWM : Smart Water Management

레지오넬라는 따듯하고 습한 환경에 존재하며, 사람에게 질병을 유발한다. 매년 , 특히 여름철에 주로 레지오넬라증 환자가 발생하고 있으며, 샤워기 사용 등 수돗물에 의해서도 질병이 발병할 가능성이 있다. 현재 레지오넬라 분석은 배양법 기반으로 이루어지는데 분석결과를 얻기까지 약 2주 이상 오랜 시간이 소요되어 수질사고나 수질이슈 발생 시 등 긴급상황에 신속한 대응이 어려운 실정이다. 이에 현장에서 초기에 신속하게 검출여부를 판단할 수 있는 신속검출시스템을 개발하고자 하였으며, 이를 위해 면역검출반응을 이용하였다. 레지오넬라 표준균주를 확보하였고, 검출 항원타겟을 레지오넬라 속(genus) 공통항원인 펩티도글리칸 관련 지질단백항원(peptidoglycan associated lipoprotein)으로 하여 대상 유전자를 증폭하고 이를 이용하여 대장균 군주에서 단백질을 과잉발현하여 항원을 준비하였다. 이 항원에 대한 항체를 이용하여 신속검출키트를 시범제작하였다. 표준균주를 이용하여 이 검출키트에 대해 테스트하여 양성반응을 나타냄을 확인하였다. 또한 레지오넬라 조사를 위한 사전조사를 실시하였다. 정수 생산 이후 배급수관망에 대해 조사지점을 선정하여 조사하였으며 레지오넬라와 공생하는 것으로 알려진 자유생활아메바 중 가시아메바와 파울러자유아메바에 대한 조사도 실시하였다. 이번 조사에서는 전 지점에서 레지오넬라가 검출되지는 않았다. 그러나 레지오넬라가 배급수관망에 오염될 경우, 강한 소독저항성 및 자유생활아메바와 공생하는 특성이 있으므로 먹는물 안전성을 확보하기 위해서는 향후 지속적인 모니터링과 관리가 필요할 것이다. 현장 신속검출용 키트를 활용할 경우 1차적으로 신속 판단 및 이에 따른 후속조치가 가능하므로 이를 이용하여 모니터링이나 수질이슈 대응 시 신속검출키트를 이용한 분석시스템 정립이 가능할 것이다.

목 차

제 출 문 1
요 약 문 6
목 차 13
표 목 차 15
그림목차 16

제 1 장 서 론 1

1.1 연구 배경 및 목적 1
1.2 연구내용 및 범위 1
1.3 연구수행 방법 1
1.3.1 현장시료 채수 1
1.3.2 시료준비 2

제 2 장 본 론 5

2.1 레지오넬라 표준균주 확보 및 배양조건 정립 5
2.1.1 표준균주 분양 5
2.1.2 균주 배양조건 정립 5
2.2 현장 휴대용 레지오넬라 검출용 키트 개발 6
2.2.1 레지오넬라에 대한 검출 항원 타겟 선정 및 유전자 증폭 6
2.2.2 유전자 재조합 plasmid 제작 7
2.2.3 레지오넬라균 PAL 유전자 과잉발현 7
2.2.4 레지오넬라균 항원 정제 8
2.3 신속검출키트 시범제작 및 성능확인 9
2.3.1 레지오넬라 신속검출키트 시범 제작 9
2.3.2 표준균주를 이용한 검출 데스트 9
2.3.3 균주 희석 단계별 검출 민감도 테스트 9
2.4 현장 조사지점 선정 및 배양법에 의한 사전 조사 11
2.4.1 정수생산 이후 배급수 관망 사전조사 11
제 3 장 결 론 21
3.1 레지오넬라균의 연구를 위한 생물한전 2등급 시설 신고 21
3.2 표준균주 확보 및 배양조건 정립 21
3.3 검출 항원의 타겟 선정 및 증폭 21
3.4 현장 검출용 신속검출키트 시범 제작 및 성능 테스트 21
3.5 현장조사 지점 선정을 위한 사전 조사 21
3.6 결론 21

참고문헌 23